Moonlight siRNA Transfection Reagent:是一种新型的高效、低毒、耐血清的转染试剂。该转染试剂可以将外源核酸siRNA递送到各种贴壁和悬浮生长细胞中,实现靶标基因的沉默效应,广泛应用于细胞基因干扰实验等。
产品特点:(1)高效,验证过多种贴壁细胞系,如293T、HeLa、HCT116、A549、Huh-7、NUGC-4、NCI-H460、RAW264.7、Jurkat等;
(2)低毒,细胞转染后,无需换液,细胞生长状态良好;
(3)稳定,细胞转染实验重现性良好;
(4)简单,单管配制转染复合物,现配现转。
实验操作:(1)细胞铺板,6孔板,细胞密度为60~80%;
(2)配制转染复合物,1.5mL离心管中先加入100uL基础培养基,然后加入50~100pmol siRNA,再加入2.5~5uL转染试剂,混匀;
(3)滴加细胞,均匀滴加到6孔板的1个细胞培养孔中;
(4)24~48小时后,进行检测实验,见图1。
图1 实验操作流程图
案例展示:(1)293T细胞,6孔板,IRAK4 siRNA用量为100pmol/孔,转染试剂用量为5uL/孔,24小时后做WB检测,见图2;
(2)293T细胞,6孔板,BCL2 siRNA用量为100pmol/孔,转染试剂用量为5uL/孔,24小时后做qPCR检测,见图3。
图2 细胞转染WB检测结果
图3 细胞转染qPCR检测结果